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SPE固相萃取技術(shù)4(固相萃取儀器裝置)

更新時間:2015-09-18點擊次數(shù):1323

SPE固相萃取技術(shù)4(固相萃取儀器裝置)

在什么項目的前處理適合使用固相萃取技術(shù),即用固相萃取會比普通的溶劑萃取更理想,個人認為有以下幾種情況:

(一)  水中有機物的前處理。

此類常規(guī)處理基本上是用與水不相溶的有機溶劑振蕩萃取,用固相萃取的優(yōu)勢在于

(1)可以定量地重復前處理過程。

 溶劑振蕩的操作一般只能要求到控制時間的程度,卻無法控制振蕩頻率,強度,動作,我們知道,每個人的振蕩動作是不同的,就是同一個人,也很難保證始終劃一的動作。所以說,溶液萃取的動作是不定量,不能重復的。

 而在應(yīng)用固相萃取時,比較容易保持過柱和洗脫速度的均一和穩(wěn)定,因此,固相萃取的萃取過程是可以重復,可定量的。

(2)現(xiàn)場處理。

水中有機物的分析有一個長期困擾我們的瓶頸。即有機物在池塘水庫等環(huán)境中能保持相對穩(wěn)定,但是一旦進入采樣瓶這個小環(huán)境中,就會迅速發(fā)生變化,所以很多水的有機物分析方法要求即采即分析,zui多不能超過4  個小時,可一般的情況是,從取水回到實驗室的時間就遠遠不止4  小時了,樣品發(fā)生了變化,分析結(jié)果的可靠性可想而知。

如果引入固相萃取技術(shù),由于其設(shè)備簡單,體積小,易于攜帶,*可以做到在現(xiàn)場一邊采樣,一邊進行前處理。采樣者帶回實驗室的是固相萃取柱,而不是水樣。這樣就能保證我們處理的是真正成份穩(wěn)定的水樣。

從實際應(yīng)用來說,在水的檢測中用固相萃取技術(shù)取代傳統(tǒng)液液萃取還有相當?shù)墓ぷ餍枰鳎壳吧胁荒?取代,但是其發(fā)展的前景很值得看好。

SPE固相萃取技術(shù)4(固相萃取儀器裝置)(3)有機試劑消耗量的減少。

在處理水樣時,如果用固相萃取,則只需要在洗脫時用到有機溶劑,用量比傳統(tǒng)液液萃取要少數(shù)十倍以上。對于實驗者的人身保護和環(huán)境保護有著積極的意義。

二)批量生物材料的藥物成分萃取

這是固相萃取在實際應(yīng)用中比較成功的范例,主要是指在醫(yī)院中檢測樣和尿樣時的前處理工作,由于對藥物成份的吸附是固相萃取的優(yōu)勢,加上樣品單一,組成固定,在確定方法后很適合大規(guī)模批量的凈化操作。


三)免疫親和固相萃取。

萃取的理想狀態(tài)就是特異性富集或特異性排斥,可是不論是溶液萃取還是固相萃取,基本上是相似相溶的,zui多做到“某一類"層次上的萃取,而無法達到“某一種"層次的萃取。

在固相萃取柱的基礎(chǔ)上加上免疫親和技術(shù),可以利用其生物特異性選擇吸附,能夠達到近于理論的萃取。

實際困難在于雖然其概念很好,但是由于技術(shù)難度相對較高,可供應(yīng)用的更少。

SPE固相萃取技術(shù)4(固相萃取儀器裝置)

三、固相萃取的應(yīng)用局限性

(1)樣品局限性

固相萃取不適于處理固體樣品。對于固體,必須將其先制備為液體形態(tài)才能進行固相萃取操作,這一點就遠不如液體萃取了。

即使是液體樣品,固相萃取也有其額外的苛刻要求,即液體必須潔凈度高,不能有懸浮物或其它固體顆粒,否則會在柱前形成堵塞,無法繼續(xù)過柱及洗脫操作。所以固體樣品要制備成液體,液體樣品還要過濾。相比來說,溶劑萃取就不存在這個麻煩,稍臟點也影響不大。

(2)結(jié)構(gòu)局限性

 固相萃取柱的結(jié)構(gòu)很簡單,除了塑料管,只有篩板和填料了。就這簡單的結(jié)構(gòu),帶來了便利,也帶來了與生俱來的矛盾,一些我們在用溶劑萃取時永遠不會遇到的矛盾。

矛盾1    液面的問題。

當我們進行活化、凈化,洗脫等典型的固相萃取操作時,會使用不同溶劑,這時的操作要求在液面下降到篩板時換加不同溶劑,加得太晚,會使填料中干涸產(chǎn)生氣泡,影響結(jié)果的穩(wěn)定性(甚至會因為溶液的張力問題而使液面無法下降)。相反,如果加得太晚,會使加入溶液和在篩板上的原有溶液混合,產(chǎn)生一個其實是我們不希望存在的、無法預(yù)料極性的新洗脫液,使結(jié)果的可靠性大打折扣。

加液加到篩板,說得容易做起來難,如果單獨做一個樣品可以緊盯液面操作。但是在批量操作時只會顧此失彼,固相萃取技術(shù)實用的一個重要意義就在于,其可以方便可靠地批量處理樣品,如果這個意義削弱的話,其實用性也就大大降低。

液面問題是制約固相萃取應(yīng)用成功的主要瓶頸,雖隱蔽卻無法回避。

SPE固相萃取技術(shù)4(固相萃取儀器裝置)解決的方法有兩種。

*種解決方法是干脆不用理會液面的困擾 ,每次都做到抽空溶液,這種做法倒是不會產(chǎn)生篩板上的溶液混合的問題,但是又會出現(xiàn)一個新的問題,即填料看起來是抽干了,但實際表面還是有數(shù)量不定的液體,每次干涸程度不一致,也無法重復。

另一種解決方法就是在使用固相萃取器時用電導探針測試,這個方法比較,但是也有一個新的問題,探針需要一個清洗過程,否則會有交叉污染的可能,而且有這類裝置的固相萃取器價格一般相當?shù)匕嘿F。且一個探針在同一時間只能探測一個樣品管,要同時監(jiān)測一批小柱則很困難。

矛盾2    填料的裝填松緊問題。

用液體萃取時我們從來不用考慮整個溶劑的密度是否均勻,但是對于固體填料,我們卻不能忽略這個問題。在同一批次甚至同一包里的幾個小柱,加上相同溶液時,我們會發(fā)現(xiàn)液體過柱的速度是不均勻的  ,總是有快有慢。

由于生產(chǎn)工藝和成本的綜合考慮,固相萃取小柱不可能采用類似填充液相色譜柱的勻漿高壓法,所以填料的裝填松緊不均勻是必然的。這就造成一個問題,由于液體流過的速度不一樣,在每次加液的時間也會不一樣,不利于同步批次處理樣品。而且回收率也會不同??催^一些公司的所謂全自動固相萃取器,其原理都有一個假設(shè),即每根小柱的流過速度應(yīng)該一致,可惜,這真的是假設(shè)――“假"的“設(shè)"想。

矛盾3    填料的質(zhì)量穩(wěn)定問題

在我們開啟一瓶二氯甲烷或丙酮時,只要買的不是偽劣產(chǎn)品,就是不同公司的也可以放心使用,因為它們的萃取性能是穩(wěn)定可靠的。而固相萃取則不同,就是同一公司的填料,每次的產(chǎn)品性質(zhì)還是有些許差異,不同公司的相差更大。而如果換一家公司的固相萃取柱或同一公司不同批次的小柱,都需要我們把所有的項目做一遍質(zhì)量評估,那估計也沒有太多人愿意使用。

矛盾4    不能加熱

一般的加熱行為可以改善吸附作用,可是由于固相萃取柱的套管是由塑料制造的,一加熱就會變形,所以只能做常溫操作。

 SPE固相萃取技術(shù)4(固相萃取儀器裝置)

TEL:0571-86139637

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